洁净手术室空气采样的空气净化技术对微生物污染采取不同程度的控制，以控制空间环境中的空气清洁度，满足各种作业的要求。洁净手术室工程是一项多学科、多系统、多功能的系统工程。洁净手术室空气净化气流一般分为随机流式、层流式、辅助流式和混流式四种形式。层流技术的使用颠覆了传统的空气采样方法，大大提高了采样要求。

1、 采样时间：

应在消毒后和操作前进行取样。

2、 抽样方法：

1.分发：

乐发II500室内区≤ 30m2，设置3个内、中、外对角线点，内外对角线点距墙1m；室内面积超过30平方米。设置四角五中心点，四角距墙1m。

2.平板曝光法：

乐发II500平板直径9cm，采样高度1.5m，曝光5min。

3.检查方法：

37℃平板培养48h。计数菌落数并分离致病菌。

乐发II5004.平板曝光法的计算结果

50000N

细菌总数（CFU/m3）=a×T。A为板面积（cm2）；T为曝光时间（min）；N是平均菌落计数（CFU）

5.结果判断

（1） 在I类和II类区域，细菌总数为≤ 10cfu/cm3，未检出致病菌为消毒合格。

（2） 在三类区域，细菌总数为≤ 200cfu/cm3，未检出致病菌为消毒合格。

（3） 在IV类区域，细菌总数为≤ 500cfu/cm2，未检出致病菌为消毒合格。

3、 抽样注意事项：

乐发II5001.在100级区域进行试验时，取样口应朝向气流方向；在其他区域检测时，采样口向上；

2.取样后的培养基条或培养皿应在37℃下培养24小时，并计算菌落数。菌落数的平均值应四舍五入至小数点后一位；

3.用浮游法测定浮游细菌浓度时，细菌检测点的数量应与被测区域内粉尘浓度的数量相同，且应在同一位置。每次取样时间不得少于30分钟。

乐发II5004.沉降法测定沉降菌浓度时，细菌测试点数不应少于粉尘浓度。如果适当延长沉降时间，可按比例减少皮氏培养皿的最小数量，但不得少于粉尘浓度测量点的最小数量。

5.无论采用何种方法检测细菌浓度，必须有两个空白对照。首次用于检测培养皿或培养基条（每批一个对照皿（条））；第二次对操作过程进行控制试验（每个房间或区域一个控制盘（条），打开并立即盖上模拟操作）；两个控制结果必须为阴性，整个操作过程应满足无菌操作的要求。